付彦秋　于树军　张乃勇
(长春市园林科学研究所)

摘　要：以矮牵牛种子为外植体，将其接种在MS+6?BA1mg/L+NAA0.03mg/L的培养基中进行培养，7～10天种子开始萌芽，15～20天新芽被诱导成愈伤组织，30天左右愈伤组织被诱导分化出丛生芽，再将丛生芽接种于MS+6?BA0.5 mg/L+NAA0.05 mg/L的培养基中进行继代培养出成苗，最后将成苗接种于1/2MS+NAA0.03mg/L培养基中，5～7天可生根，7～10天生根率可达100%。
　　关键词：矮牵牛；组织培养；快速繁殖
　　矮牵牛（petunia hybrida vilm）又名“碧冬茄”、“灵芝牡丹”，为茄科多年生草本，通常作一年生栽培。原产南美，为矮牵牛（pviolacea）与腋花矮牵牛（p.axillaries）的杂种。矮牵牛花大，花色丰富，花期长，栽培管理省工，园林绿化上需求量大。但由于重瓣或大花品种常不易结实或实生苗不易保存母本的优良性状，常采用扦插繁殖，但扦插繁殖速度太慢，满足不了生产发展的需要，而组织培养可在短时期内获得大量的优良种苗。为此，我们于2000～2001年开展了矮牵牛组培快繁的研究工作。
　　一、材料与方法
　　(一)材料
　　试验所用材料为美国矮牵牛杂交一代新品种
　　(二)方法
　　1?材料的消毒和接种
　　将矮牵牛种子用少量洗涤剂洗去表面灰尘，用蒸馏水冲洗干净，放入70%酒精中消毒2分钟，之后用无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒10分钟，用无菌水冲冼4次备用，将消毒后的种子在无菌条件下接种于培养基中。
　　2?培养基的筛选
　　本试验采用的培养基为MS培养基，附加的植物生长调节物质为BA和NAA；蔗糖浓度为3%，卡拉胶浓度为0.4%，PH值为5.8。培养基筛选时，首先进行细胞分裂素（BA）浓度的筛选。
　　方法：
　　在添加0.03 mg/LNAA的培养基中添加不同浓度的BA。其浓度为0.1、0.5、1.0、和1.5 mg/L，培养30天后，根据培养物的生长状况和增殖数量确定最佳的BA浓度。然后进行生长素（NAA）浓度的筛选，其方法为：在上述筛选出最佳BA浓度的培养基中添加不同浓度的NAA。其浓度为0.01、0.02、0.03和0.04 mg/L。根据培养物的生长状况和增殖数量，确定最佳生长素浓度。
　　3?培养条件
　　接种后的培养物放置在培养架上进行培养，出芽前需遮光，培养温度控制在23±2℃。光强为1500～2000LX，每天光照14小时。
　　二、结果与分析
　　(一)芽的诱导
　　将灭菌的种子接种在MS+不同浓度的6?BA+NAA0.03 mg/L的培养基上，6?BA的浓度为0.1、0.5、1.0和1.5 mg/L，经10～30天，种子萌发，并诱导出愈伤组织，同时分化出许多丛生芽。结果表明，6?BA的浓度以1.0 mg/L为最佳。以同样方法筛选NAA最佳浓度为0.03 mg/L。
　　(二)芽的增殖和生长
　　将分化出的丛生芽分别转接到MS+6?BA0.1mg/L+NAA0.02mg/L（处理1）、MS+6?BA0.3mg/L+NAA0.02 mg/L（处理2）、MS+6?BA0.5 mg/L+NAA0.02 mg/L（处理3）、MS+6?BA0.5 mg/L（处理4）培养基上，20～30天继代一次，从表1看出，在生长素浓度相同情况下，高浓度的6?BA提高了苗的繁殖系数，且苗的生长状况也随之发生变化，在不含生长素的培养基中，苗的生长受到影响。

表1 不同培养基对试管苗增殖和生长的影响（见园林科技信息）

表2不同浓度对试管苗生根的影响（调查时间为10天）（见园林科技信息）

　　当试管苗根长2～3cm时，可进行试管苗移栽，根据试验，以珍珠岩为基质的幼苗移栽成活率为68%，而以沸腾炉渣为基质和以蛭石和珍珠岩（比例为2：1）为基质的幼苗成活率分别为92%和93%，这说明以沸腾炉渣、蛭石与珍珠岩混合为基质的均可。试管苗移栽后管理非常重要，要注意控制好温度、湿度及光照，试管苗移栽后要搭塑料拱棚，光强时要适当遮荫，每天早晚通风一次，一周后将塑料拱棚去掉，试管苗移栽20天后，可移栽到营养土中（上盆），一周后可移至室外。
　　三、结论
　　我们采用组织培养的方法快速繁殖矮牵牛获得成功，并研究出适于矮牵牛快繁的培养基配方和试管苗快速繁殖技术。外植体的诱导及芽的诱导以MS附加6?BA1.0+NAA0.03mg/L效果最好，芽的分化比较理想的培养基是MS+6?BA0.5mg/L+NAA0.02mg/L，根的诱导以1/2MS+NAA0.03mg/L效果最佳，根的诱导率为100%，试管苗移栽采用沸腾炉渣为基质以及蛭石和珍珠岩混合（2：1）为基质效果均较好。移栽成活率分别为92%和93%。

　　参考文献：
［1］李瑛，郑国庆.重瓣矮牵牛的组织培养.北方园艺，1993，2.