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观赏植物组织培养中玻璃化问题的解决方案
20世纪30年代发展起来的植物组培技术经过几十年的探索,已经在科研和生产上得到了广泛应用,并已经成为观赏植物快繁的重要途径。但是,试管苗玻璃化现象严重降低了植物组培的效率,造成人力、物力、财力的极大浪费,成为当今组培工作尤其是工厂化生产和试管材料保存的一大障碍。自1981年Debergh首先提出了试管植物“玻璃化作用(vitrification)”的概念以来,关于植物组织培养中玻璃化的原因和防止措施的研究报道很多,并积累了一定的数据与经验。 玻璃苗是在试管内控制条件下培养植物的产物,是人工提供的培养基和培养条件不完全符合培养物固有需要的结果,培养基和培养条件不适宜、不平衡是试管苗玻璃化发生的直接原因。植物试管苗玻璃化是组培过程中的三大难题之一,试管苗玻璃化问题的解决必将有助于提高整个植物组织培养的科学水平和经济效益,因此,在实际工作中有必要采取措施使观赏植物试管苗的玻璃化现象降低到最低限度,直至消除玻璃化现象。随着对玻璃化研究的深入,在控制玻璃苗发生时,大多研究者均采用如下措施:选不易玻璃化的品种及部位做外植体材料。不同植物种类适宜的外植体部位可能不同,周菊华等认为瑞香中部茎段发生玻璃化的几率最大,而吴若箐等的结果表明香石竹的基部茎段发生玻璃化的可能性最大,这可能与不同植物的生理特性有关。 利用固体培养基,增加琼脂浓度，选择适当的碳源,提高培养基中蔗糖含量，从根本上降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏,减少培养基中植物材料可获得的水分,因而可明显降低观赏植物试管苗玻璃化现象。采用通气性好的封口材料如纱布、脱脂棉等代替聚乙烯塑料膜作为封口材料,可降有效低培养容器内部环境的相对湿度,减轻有害气体的积累,使植物光合作用顺畅。培养基中ＢＡ是导致试管苗玻璃化的一个重要原因，选择搭配合适的激素,适当降低培养基中ＢＡ的浓度均可减轻玻璃苗的出现。通过培养条件(温度和光照)减少玻璃苗的发生。控制温度,避免过高的培养温度,进行变温处理,适当低温处理可消除玻璃化，提高光照强度,适当延长光照时间,充分利用自然光照也可以减低玻璃苗的发生频率。 另外,在培养基中减少或除去ＮＨ4ＮＯ3，附加活性炭、青霉素、聚乙烯醇(ＰＶＡ)、Ｃａ、赤霉素(ＧＡ)及多效唑(ＰＰ333)等,减少继代培养的次数等措施均可降低观赏植物组培过程中玻璃苗的发生。
编辑：Aggie |
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